Название: Анализ наркотических средств

Тема: Медицина

Просмотров: 1789


3.7. производные фенотиазина

Аминазин, дипразин, левомепромазин, тиори-дазин являются наиболее часто встречающимися препаратами, на которые анализируются биологические объекты.

Данные соединения в виде оснований плохо растворяются в воде, хорошо — в этаноле, хлороформе, эфире. Высокая липофиль-ность фенотиазинов обусловливает их депонирование в жировых тканях, вследствие чего они обладают большим периодом пол у выведения, т.е. медленно выводятся из организма. Все фенотиазины относятся к веществам основного характера. Так, величина рКа для аминазина — 9,3, дипразина — 9,1, тиоридазина — 9,5, лево-мепромазина — 9,3.

Растворы производных фенотиазина интенсивно поглощают в ультрафиолетовой области спектра. В их спектре отмечаются два максимума — 250 — 255 и 320 нм. Положение максимума определяется видом и положением заместителей в молекуле фенотиазина.

Метаболитц, особенно сульфоксиды, имеют более сложный спектр, например, в разбавленной кислоте спектр хлорпромазин-сульфоксида характеризуется четырьмя максимумами — при 239, 274, 300 и 341 нм.

Основные характеристические частоты ИК-спектров, отражающие типы связей и функциональных групп фенотиазинов, сведены в табл. 23.

Обнаружение производных 1,4-бензодиазепина производят реагентами, дающими различные окраски:

а)         реактив Драгендорфа в разбавленной уксусной кислоте об-

разует оранжевые и желто-оранжевые комплексные соли;

б)         реактив РРЫ (хлорид железа (III) в смеси хлорной и азотной

кислот) окисляет бензодиазепины с образованием окрашенных про-

дуктов желто э цвета;

в)         реактив Марки образует окрашенные продукты желтого цвета;

г)         подкисленный йодплатинат образует темноокрашенные пятна.

Производные фенотиазина являются химически очень лабильными соединениями, особенно легко окисляется атом серы, давая различные продукты сульфоокисления. Радикальные реакции окисления одинаково легко осуществляются как в растворах этих веществ в условиях окружающей среды, так и в живом организме.

Основные метаболитические реакции — это сульфоокисление', 1Ч-деметилирование, гидроксилирование, окисление, конъюгация с глюкуроновой кислотой.

Главным путем выведения фенотиазинов является моча. Методики определения производных (фенотиазина в биологических жидкостях описаны в методических указаниях "Химико-токсикологический анализ веществ, вызывающих одурманивание" (М.: МЗ СССР. 1989); более подробные сведения об анализе фенотиазинов можно найти в работах Е.М. Соломатина.

 

ОТБОР И ПОДГОТОВКА ПРОБЫ К АНАЛИЗУ

 

На стадии пробоподготовки образец очищается от загрязнений, которые не следует отбрасывать, так как они могут быть источником дополнительной информации. Пробоподготовка — это стадия риска потерять анализируемое вещество и объект. Поэтому нелишне помнить о необходимости строгих и логически оправданных действий, направленных на сохранение образцов, отобранных для анализа, для дальнейшего исследования.

На стадии пробоотбора в анализе наркотических средств следует учитывать возможность уничтожения или фальсификации объекта; анализируемая проба может быть мала по массе, загрязнена и иметь химический состав, отличный от первоначального из-за воздействия окружающей среды при неправильном хранении.

При пробах небиологического происхождения (растительное сырье, порошки, таблетки, экстракты и проч.) навеска для анализа отбирается произвольно, если только она не оговорена методикой и не ограничена малым объемом образца. Самая маленькая проба должна, быть проанализирована самыми чувствительными методами. Критерием выбора метода в этом случае является предел обнаружения вещества. Образцы небиологического происхождения, как правило, изымаются в процессе оперативно-следственных мероприятий и являются вещественными доказательствами.

Вид, количество биообразца, исследуемая аликвота в случае судебно-химического анализа, устанавливающего причины смерти, регламентируются соответствующими методическими письмами и рекомендациями.

Наиболее распространенным биологическим объектом для обнаружения в нем наркотических средств является моча. Выбор этого биообъекта для анализа обусловлен несколькими причинами. Во-первых, моча представляет собой один из самых информативных объектов, так как большинство наркотических веществ и их метаболиты выводятся из организма с мочой. Во-вторых, по существующим юридическим нормам процесс отбора биопробы не должен причинять обследуемому физического неудобства. Среди других биообъектов при анализе наркотических средств могут быть взяты на анализ кровь, слюна, волосы и др.

Процедура отбора пробы мочи должна обязательно проводиться под наблюдением персонала для предупреждения замены или порчи пробы. Необходимо учитывать, что проба может быть заменена образцом в заранее принесенном контейнере (грелка, склянка и т.д.), проба может быть испорчена добавлением воды, принесенного с собой уксуса, отбеливателей и других химических реагентов.

Объем отбираемой мочи должен быть не менее 250 мл. В случае меньшего количества биообразца в итоговом протоколе этот фак-! должен быть обязательно отмечен.

Сразу же после отбора пробы осуществляется предварительный осмотр ее с целью выяснения возможной фальсификации. В него входит: а) измерение температуры мочи; не позднее 5 минут после отбора температура отобранной биожидкости должна находиться в пределах 32,5 — 37,7°С; в случае значительного отклонения измеренной температуры отбор пробы повторяется с более тщательным наблюдением за процессом отбора; б) измерение рН мочи, которое должно находиться в пределах 5 — 7; в) визуальный осмотр (цвет, мутность) должен подтвердить естественность отобранной пробы.

Отобранная проба разливается в две ёмкости для хранения и транспортировки, для чего она маркируется, кодируется и опечатывается. Один из образцов анализируется на содержание наркотических средств, другой представляет собой образец для контрольного анализа.

При анализе мочи, точно так же как и других биологических объектов, на содержание одурманивающих веществ необходимо обращать внимание на потенциальные фоновые соединения как эндогенного, так и экзогенного характера, присутствие которых в анализируемом образце неизбежно при любом способе пробопод-готовки.

Такими фоновыми эндогенными соединениями будут низкомолекулярные продукты метаболизма белков, аминокислот и Сахаров (биогенные амины, мочевина, соли карбоновых кислот и др.), небольшие количества пептидов, Сахаров, стероидов, пигмента уробилина и других веществ.

Среди разнообразных экзогенных фоновых соединений будут присутствовать продукты биотрансформации веществ, поступивших с пищей, и различных лекарственных веществ, используемых наркоманами для усиления наркотического эффекта, снятия синдрома абстиненции, смягчения "выхода" из состояния наркотического опьянения (барбитураты, производные 1,4-бензодиазепина), а также метаболиты других химических веществ, попавших в организм (красители, антиоксиданты, продукты табакокурения и т.д.).

Преданалитическая обработка мочи может состоять из различных операций: прямое концентрирование, экстракция растворителем, лиофилизация, хроматографическое разделение или сорбция на твердом сорбенте или комбинация различных операций (концентрирование— экстракция, лиофилизация — экстракция и др.).

Прямое концентрирование достигается упариванием некоторого количества мочи до небольшого объема на водяной бане либо роторном испарителе или лиофилизацией. Приемы концентрирования и очистки биообразца с использованием сорбции изложены в методических указаниях "Химико-токсикологический анализ наркотических и других одурманивающих веществ" (М.: МЗ СССР, 1987).

Жидкость-жидкостная экстракция как метод изолирования анализируемых соединений из мочи остается на сегодняшний день самым распространенным приемом выделения наркотических средств из биообъектов. В основе ее лежит распределение вещества между двумя несмешивающимися жидкими фазами. Количественно такое распределение можно охарактеризовать величинами коэффициента распределения (Кр) или логарифма отношения коэффициентов распределения (log Р) вещества в различных органических растворителях, не смешивающихся с водой (см. Приложения), и величиной фактора извлечения (процент извлечения).

Фактор извлечения будет зависеть от химической природы экстрагируемого вещества, и в первую очередь от константы его ионизации (рКа) (см. Приложения), значения рН мочи при выполнении экстракции, селективности экстрагента и внешних условий процесса (температура, техника выполнения и т.д.).

 

ХАРАКТЕРИСТИКА БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ

 

Большинство анализируемых биообъектов, содержащих токсические вещества, делятся на следующие категории в зависимости от их морфологических особенностей, определяющих соответствующие схемы пробоподготовки.

Жидкости с небольшим содержанием биологического материала — промывные воды желудка, вода, вино, пиво, спирты, минеральная вода.

Жидкости с заметным содержанием биологического материала — кровь, желудочный сок и содержимое кишечника, чай, кофе, молоко, сиропы, супы.

Твердые вещества, которые являются простыми соединениями или простыми смесями, — таблетки, капсулы, сахар, соль, остатки "неизвестного" порошка и т.д.

Твердые вещества, которые являются сложными смесями, — хлеб, жиры, масла и все виды живых тканей (мускулы, волосы, ногти, мозг, печень, почки), растительные ткани, цветы.

Каждая из этих групп требует своей аналитической схемы, так как методы изолирования, описанные для мочи (тип 1), не всегда пригодны для крови (тип 2) и тканей (тип 4), и наоборот (схемы 17 — 20). Методы изолирования, которые включают этап удаления белков, обычно необходимый для типа 4, совсем не обязательны для такого биоматериала с небольшим содержанием белка, как моча.

Правильные результаты анализа в целом и экстракции в частности во многом зависят от доинструментального этапа, т.е. пред-аналитической техники обработки образца. Для каждого биообъекта необходимо предусмотреть в связи с его спецификой следующее: 1) корректный отбор пробы; 2) хранение пробы; 3) подготовку пробы к экстракции; 4) схему и метод экстракции; 5) наличие эндогенных и экзогенных веществ, влияющих на чистоту экстракта и конечный анализ яда и его метаболитов.

Если первые четыре фактора связаны с техникой экстракционной обработки, учет последнего фактора требует от исследователя знания токсико- и фармакокинетических параметров биологической матрицы и анализируемого образца. На содержание эндогенных и экзогенных компонентов в экстракте влияют: 1) возраст, пол и вес пациента, определяющие во многом распределение яда и его метаболизм; 2) параллельное присутствие других экзогенных химических веществ (лекарственные средства, кофеин, табак, алкоголь и др.), изменяющих фармакокинетические и фармакодинамические параметры яда; 3) диета — свободные жирные кислоты связываются с альбуминами и конкурируют на этапе связывания яда с белком: так, если токсическое вещество введено до приема пищи, то вследствие особенностей всасывания усиливается реабсорбция яда в тонкой кишке и соответственно повышается его концентрация в крови; 4) генетический эффект — относительно человека подобная информация очень разноречива, однако необходимо отметить, что отдельные индивидуумы обладают повышенной толерантностью к действию некоторых химических агентов; если для одних доза введенного яда является смертельной, то для других эта же доза относительно безвредна (по крайней мере не вызывает летального исхода); 5) другие факторы, действие которых необходимо предусматривать,— болезнь (может дать повышенный фон некоторых эндогенных соединений), работа с соединениями бытовой или индустриальной химии (повышенный фон эндо- и экзогенных веществ). Ниже приводятся некоторые особенности различных биообъектов.

Моча — наиболее распространенный объект исследования на лекарственные токсические соединения и наиболее простой биообъект (среди других) для анализа вследствие низкого содержания белковых компонентов.

Важным показателем мочи как биообъекта является рН, поэтому работа с ней требует постоянного внимания к изменению рН. Величина рН мочи повышается со временем из-за действия бактериальной флоры, выделяющей аммиак. Такое увеличение можно предотвратить путем ее хранения при пониженных температурах (при анализе очень лабильных веществ — в замороженном виде). Действие бактериальной флоры можно замедлить добавлением натрия фторида, борной кислоты и других бактериостатических препаратов, однако надо учитывать их дальнейшее участие в экстракции и образовании фона. Мочу можно лиофилизировать, предварительно переведя летучие соединения в соответствующие соли.

Из потенциальных эндогенных соединений необходимо отметить присутствие низкомолекулярных продуктов метаболизма аминокислот и Сахаров (амины, мочевина, карбоновые кислоты и др.), небольших количеств пептидов и Сахаров (в норме), стероидов и пигмента уробилина, окрашивающего мочу в желтый цвет (А макс - 490 мм) и мешающего спектрофотометрическому определению.

Преданалитическая обработка мочи состоит из различных one-раций: прямого концентрирования, экстракции растворителем, хро-матографического разделения или сорбции на твердом сорбенте. Как правило, изолирование из мочи проводят по схеме 17.

Кровь. Уровень токсических веществ и их метаболитов у живых объектов и в крови трупа неодинаков вследствие биохимических изменений. Содержание токсического вещества в артерк альной или венозной крови также будет различным. Даже поли

жение тела у живого пациента — стоя, сидя или лежа — влияет на биохимический состав пробы, так как в этом случае меняется содержание белков в крови, что особенно важно для токсических веществ, в значительной степени связывающихся с белком.

Жидкости с небольшим содержанием биологического материала (моча, промывные воды желудка, вода, вино, пиво, спирты, минеральная вода)

Подкисление образца конц. HCl и четырехкратная экстракция диэтиловым эфиром

1

Экстракт

Водный слой

1

1

ный

Подщелачивание NH4OH и четырехкратная экстракция СНС13

Высушивание безв. Na2S04, фильтрование, упаривание

1

Водный слой (отбрасывается)

I

Остаток Л (соединения кислотного и нейтрального характера)

Экстракт

I

Высушивание безв. №г804

I

Остаток 2 (вещества

основного характера)

Схема 17

Обработке экстракцией может быть подвергнута цельная кровь, плазма или сыворотка. Если для предотвращения свертывания крови использовались антикоагулянты, то необходимо учитывать, что гепарин вытесняет жирные кислоты из мест их связывания с альбумином. Это влияет, с одной стороны, на увеличение связывания токсических веществ с белками, с другой — на переход жирных кислот в органический растворитель при экстракции. Для уменьшения энзиматической активности кровь рекомендуется хранить в холодильнике в замороженном виде.

Поскольку стеклянные стенки посуды содержат большое количество свободных гидроксильных групп, возможно связывание полярных токсических соединений стенками посуды за счет образования водородной связи. Это явление особенно важно учитывать при анализе следовых количеств вещества. Предварительное сили-лирование стенок посуды позволяет свести это явление к минимуму. Альтернативой является использование посуды из полипропилена или тефлона, хотя при этом необходимо считаться с загрязнением пробы мономерами смолы.

Из других эндогенных соединений помимо жирных кислот в экстрактах из крови встречаются различные стероидные гормоны (тестостерон и др.), холестерин, которые в крови находятся в связанном состоянии с протеинами плазмы.

Слюна является продуктом секреции желез ротовой полости. Отобранную пробу слюны центрифугируют и для хранения замораживают, чтобы замедлить активность ферментов. Хранить лучше всего в склянках из тефлона или полипропилена, чтобы избежать поглощения следовых количеств анализируемого вещества стенками стеклянной посуды. Установлено, что неионизированные формы токсического вещества, находящиеся в водном растворе плазмы, пассивно диффундируют в слюну, так что существует прямая зависимость между концентрацией анализируемого вещества в слюне и его концентрацией в крови.

Волосы представляют собой относительно гомогенный (с точки зрения агрегатного состояния) биологический субстрат. Являясь легкодоступными для отбора, они представляют значительный интерес в качестве объекта при проведении химико-токсикологического анализа как на неорганические, так и на органические яды.

В последние годы установлено, что в волосах наркоманов обнаруживаются опиаты, амфетамины, фенциклидин, метаквалон, кокаин, каннабиноиды. Таким образом, возникает возможность обнаружения наркотиков в отдаленные сроки после окончания их приема и в тех случаях, когда анализ биожидкостей дает отрицательный результат. Важно, что наркотические вещества не мета-болизируют в волосах.

Для отбора пробы на площади около 1 см срезается прядка волос как можно ближе к основанию. При этом очень важно, чтобы волосы не изменяли своего относительного положения. Прядка фиксируется липкой лентой на бумаге, помечается верх и низ прядки. Принимая во внимание скорость роста волос (примерно 1 см в месяц), образец делится на кусочки различной длины и исследуется. При этом появляется возможность проследить динамику поступления наркотического вещества в организм пациента. Анализ волос длиной 6 — 8 см (6 — 8 месяцев) позволяет судить о степени тяжести наркотической зависимости.

Ногти содержат 10,1 — 13,7\% воды и 0,15 — 0,76\% жиро-подобных веществ (холестерин и его эфиры). Из органических веществ основным является белок кератин, устойчивый к воздействию различных химических веществ, а из минеральных веществ —

Подпись: Двукратная реэкстракция в насыщенный раствор свежеприготовленного ШНСОз (Уо:Ув-1:1)кальций, фосфор, цинк, мышьяк и др. В нашей стране факт накопления в ногтях наркотических соединений, и прежде всего опиатов, установлен недавно Е.А. Симоновым. Однако данных по определению наркотиков в ногтях еще недостаточно.

Желчь является продуктом секреторной деятельности печени, желчного пузыря и двенадцатиперстной кишки. Эта жидкость содержит большое количество воды, эндогенных веществ, подобных тем, которые находятся в крови, плазме и сыворотке, а также желчные кислоты и пигменты. Желчь различается по величине рН (в пределах 6,7 — 8,3), что заставляет контролировать рН в ходе подготовки к экстракции, а при необходимости использовать подходящий буфер. Рекомендуется также пробу центрифугировать при низких скоростях (для удаления холестерина) и осадить белки добавлением смеси хлороформ — метанол (2:1) или хлороформ — изопропанол (9:2).

При экстракции из желчи желчные кислоты образуют стойкую эмульсию, поэтому для разделения фаз необходим длительный период центрифугирования; так как большинство токсических веществ выделяется из желчи в виде конъюгата с глюкуроновой кислотой, желчь перед экстракцией подвергают гидролизу или обработке /3 -глюкуронидазой, а затем уже проводят экстракцию.

Экстракты из желчи часто окрашены, что затрудняет их спек-трофотометрирование. Предварительное осаждение белков несколько осветляет пробы.

Вследствие липофильного характера большинства эндогенных веществ желчи экстракты обладают значительным фоном, особенно при использовании неполярных растворителей. Желчь экстрагируется по схеме 18.

Фекалии. Этот биообъект анализируется на содержание токсического вещества, которое экскретируется вместе с желчью, а также если известно, что оно не полностью абсорбировалось в желудочно-кишечном тракте после орального введения.

Для длительного хранения пробы замораживают или лиофили-зируют, чтобы замедлить действие бактериальной флоры и уменьшить неприятный запах. Основная преданалитическая обработка состоит в гомогенизации пробы. Высушенные образцы, как правило, дают более воспроизводимые результаты. Экстракция проводится по схеме 18 или 20 при соответствующих значениях рН.

Основные эндогенные соединения — желчные кислоты, стероиды, сахара и порфирины. Вследствие присутствия в биообъекте большого количества экзогенных веществ, поступивших с пищей, результаты анализа отличаются большой вариабельностью.

Печень представляет собой центральный орган химического гомеостаза. К основным функциям относятся обмен белков, углеводов, липидов, ферментов, витаминов, водный, минеральный и пигментный обмен, секреция желчи, детоксицирующая функция. Ее многообразные функции обусловливают присутствие самых разнообразных эндогенных и экзогенных соединений в экстракте. Это—

водой, подкисление НО (Уо:Ув-10:1)

Жидкости с заметным содержанием биологического материала (кровь, содержимое желудка, кишечника, чай, кофе, молоко, сиропы, супы)

 

Четырехкратное разбавление пробы и экстракция диэтиловым эфиром

±

1

Экстракт

Водный слой

1

 

Подщелачивание конц. ЫШОН и экстракция хлороформом (Уо:Ув-4:1)

1

1

Водный слой

Водный слой Хлороформный (отбрасывается) слой

1

Эфирный слой

Осушивание безв. №2804, фильтрование, осторожное упаривание

Осушивание безв. №804, фильтрование, упаривание

^

Остаток 2 (сильнокислые вещества)

Подкисление конц. НС1, двукратная экстракция диэтиловым эфиром (Уо:Ув-2:1)

 

Осушивание безв. №гДО4 фильтрование, упаривание

Остаток 3 (основные вещества)

 

Остаток 1 (слабокислые и нейтральные вещества)

Схема 18

продукты белкового обмена (самый разнообразный белок и продукты его метаболизма вплоть до аммиака и мочевины), углеводного обмена (промежуточные продукты синтеза гликогена, окислительного фосфорилирования, реакций цикла Кребса), жирового обмена (метаболиты стероидов, полупродукты синтеза нейтральных, фосфо-и гликолипидов, холестерина и т.д.), продукты биотрансформации экзогенных, в том числе токсических, веществ, синтеза желчных кислот (холевая, дезоксихолевая и другие желчные кислоты). Пигментный обмен приводит к образованию так называемых билинов — окрашенных веществ, которые вносят соответствующий фон и мешают спектрофотометрическому определению. Разрушение гемоглобина приводит к образованию открытых тетрапирролов, издавна известных как желчные пигменты: образованные в результате ферментативного расщепления билирубины (билирубин и биливердин) выводятся с желчью в виде глюкуронидов. Бактерии кишечника восстанавливают билирубин до бесцветных структур, которые на воздухе окисляются до желто-коричневых продуктов, придающих окраску фекалиям и моче (стеркобилин и уробилин).

Биливердин и билирубин представляют собой кислоты и поэтому растворимы в водных растворах едких щелочей. Их соли с большинством ионов нещелочных металлов в воде нерастворимы; кальциевая соль билирубина является главным компонентом желчных камней.

Для большинства билинов характерно интенсивное поглощение света в видимой области (биливердин — 680 нм, билирубин — 450 нм, уробилин — 490 нм).

С точки зрения присутствия эндогенных соединений в экстракте из печени этот объект является самым неудобным вследствие их большого разнообразия. Даже самая длительная и многоэтапная экстракция, например, кислых лекарственных средств дает в хлороформном экстракте до восьми разнообразных эндогенных соединений.

Токсические соединения экстрагируются из печени по схеме 20.

Ткани мозга. Этот вид биообъекта отличается высоким содержанием липидов, и прежде всего фосфолипидов, стеринов и др. Среди продуктов метаболизма белковых веществ необходимо отметить присутствие низкомолекулярных пептидов (в том числе и обладающих опиатными свойствами). Из стеринов в тканях мозга отмечается значительное присутствие холестерина (0,25 — 0,30\% в сухом веществе). Больше всего холестерола содержится в нервной ткани, особенно в белом веществе. В целом в мозговой ткани содержание его равняется 2 — 3\%, в сером веществе — 0,9 — 1,4\%, а в белом веществе — 4 — 5,3\%.

При экстракции из тканей мозга необходимо учитывать, что холестерол хорошо растворим в ряде органических растворителей (хлороформ, диэтиловый эфир, горячий этанол, бензол, сероуглерод, толуол, ацетон). В воде он нерастворим, но легко набухает, образуя стойкую эмульсию, вследствие чего может удерживать огромное количество воды, превышающее его массу в 100 раз. Поэтому становится очевидной необходимость предварительного (перед экстракцией) удаления липидов из пробы, что требует прежде всего разрушения комплекса "липид — жирорастворимое лекарство".

Ткани мозга экстрагируются по схеме 20.

Твердые вещества, являющиеся простыми соединениями или простыми смесями

(таблетки, капсулы, сахар, соли, остатки "неизвестного" порошка и т.д.)

 

Обработка пробы (100мг) этанолом (10мл)

Фильтрат -

фильтрат

4

 

фильтрование

Анализ экстракта подходящим методом (ТСХ, ВЭЖХ, ГХ и др.)

Обработка водой (10мл) Фильтрование

 

Анализ экстрактов подходящим методом

 

19

Подпись: ▼
Водный слой

Подщелачивание конц. ХШОН экстракция хлороформом (Уо:Ув-4:1)
Подпись: Хлороформный слойПодпись: Осушивание безв. a2S04, фильтрование, упариваниеПодпись: Остаток 4 (основные вещества)Твердые вещества сложного смесевого состава (цветы, хлеб, жиры, масла, биологические (мускулы, мозг, печень, почки) и растительные ткани)

Фильтрат

 

Гомогенизация образца (100 г) водой (10 мл), подкисление конц. НСІ, добавление 50 мл Н2О, насыщение твердым сульфатом аммония, нагревание на водяной бане 30 мин и фильтрование Л.

Остаток (отбрасывается)

т

Экстракция диэтиловым эфиром (Уо:Ув-1:1)

і

*          —

Экстракт

1

 

Двукратная реэкстракция в 10 мл насыщенного свежеприготовленного раствора №НСОз

1

Водный слой (отбрасывается)

Экстракт

*

Двукратная реэкстракция в 10 мл №ОН

—*

Водный слой

            ♦ 4

1

Подкисление конц. НО, двукратная экстракция равным объемом диэтилового эфира

Водный слой (отбрасывается)

Эфирный

СЛОЙ

и

Осушивание безв. Каг304, * фильтрование, упаривание

4

Остаток 3 (сильнощелочные вещества)

а

 

Эфирный Водный слой слой

Обработка

Остаток 2 (слабокислые вещества)

 

Осушивание безв. №2804, фильтрование, упаривание

 

Остаток 1 (нейтральные вещества)

Схема 20

 

ОСОБЕННОСТИ ИНТЕРПРЕТАЦИИ РЕЗУЛЬТАТОВ В АНАЛИЗЕ БИОЛОГИЧЕСКИХ ОБЪЕКТОВ НА СОДЕРЖАНИЕ ВЕЩЕСТВ, ВЫЗЫВАЮЩИХ ОДУРМАНИВАНИЕ

 

Используя полученные результаты, аналитик-токсиколог должен не только подтвердить или опровергнуть предположение о присутствии одурманивающего средства в анализируемом образце, но и различить случаи хронического и разового использования наркотических средств. Последнего можно достичь, если сопоставить концентрации обнаруженного вещества и его метаболитов. Как правило, более высокие концентрации метаболитов свидетельствуют о хроническом применении, а значительное превышение концентрации вещества над концентрацией метаболита— об остром отравлении (разовом употреблении).

Для правильной интерпретации результатов анализа важно знание формы и способа введения. Внутривенное введение или ингаляция в начальный момент дают более высокие концентрации вещества в крови, чем внутримышечное, оральное, подкожное.

В случае анализа трупного материала равные концентрации, обнаруженные в печени и крови, свидетельствуют о хроническом использовании высоких доз наркотических веществ. В случае острого отравления концентрация анализируемого вещества в печени значительно превышает концентрацию его в крови. Высокие концентрации одурманивающих средств в крови на раннем этапе после внутривенного или орального введения будут соответствовать более высоким концентрациям в легких и печени, в то время как в период выведения концентрация в желчи и моче будет выше, чем в крови.

Одурманивающие средства основного характера дают сравнительно низкие концентрации в крови, а отношение концентраций в печени и крови часто выше 10. Соединения кислого характера дают умеренно высокие концентрации в крови, и это отношение находится в пределах от 2 до 5. Для веществ нейтрального характера наблюдаются высокие концентрации в крови и почти одинаковое содержание в других тканях.

Для корректной интерпретации полученных данных такого биообъекта, как моча, необходимо также знание дозы, времени, способа и периодичности введения вещества, кинетики распределения. Однако надо оговориться, что в случае наркотиков подобная информация редко доступна и не всегда полна. Тем не менее можно высказать следующие замечания:

Чем выше введенная доза, тем больше вероятность их обнаружения. Высокие дозы обычно дают более высокие концентрации в плазме и моче. Так, например, при использовании 30 мг кодеина он может быть детектирован в моче в течение 1 — 6 часов после употребления, а при дозе в 60 мг — в течение 1 — 10 часов.

Концентрация вещества в плазме зависит от его распределения в организме, метаболизма и выведения. Для каждого вещества его фармакокинетика индивидуальна. Концентрация наркотических веществ в моче варьирует по сравнению с плазмой и зависит от объема и рН мочи.

Каждое вещество сохраняется в организме разное время. Такое вещество, как кокаин, элиминируется из организма относительно быстро. Например, обычная доза кокаина может быть детектирована в течение дня и менее. Ежедневное длительное употребление кокаина позволяет его обнаруживать в течение двух-трех дней после окончания употребления.

При курении одной сигареты гашиша в день в моче детектируются каннабиноиды в течение одного-двух дней после последнего употребления и в течение трех — пяти дней более чувствительными методами. Ежедневное курение позволяет обнаруживать каннабиноиды в течение трех и более недель после прекращения употребления.

Общим правилом является факт, что хроническое употребление гашиша приводит к аккумуляции веществ и их метаболитов в организме. Чем чаще прием, тем больше вероятность их обнару* жения.

Различные вещества сохраняются в организме по-разному в зависимости от их химического строения и частоты употребления. Вещества, подобные кокаину, быстро выводятся из организма, поэтому отбор пробы мочи должен производиться как можно скорее после приема наркотика. Для веществ, которые медленно выводятся из организма (например, компоненты гашиша), время отбора мочи не имеет решающего значения.

Поскольку концентрация большинства веществ в моче (за исключением этанола) не коррелирует с их концентрацией в крови и степенью наркотического воздействия, время употребления наркотического вещества по концентрации в моче не может быть установлено.

 

ЭКСПРЕССНОЕ ТЕСТИРОВАНИЕ НАРКОТИЧЕСКИХ И ДРУГИХ ОДУРМАНИВАЮЩИХ СРЕДСТВ

 

1Л. АНАЛИЗ ПРОБ, НЕ ТРЕБУЮЩИХ СПЕЦИАЛЬНОЙ ПРОБОПОДГОТОВКИ

Изъятые вещественные доказательства тщательно визуально осматриваются. Если образцы в разных упаковках отличаются чем-либо друг от друга (цвет, степень измельчения и т.д.), они отделяются от общей основной массы и анализируются отдельно. В случае если образцы однородны по своему состоянию, поступают следующим образом.

При количествах менее 10 упаковок анализируется содержимое всех образцов; от 10 до 100 — произвольно выбирается 10; при 100 — произвольно выбирается количество упаковок, равное корню квадратному из общего количества.

Качество образца, его агрегатное состояние, так же как и концентрация физиологически активных веществ в нем, различаются очень широко — от образца 100\%-ной чистоты до очень разбавленных (наркотики кустарного приготовления, "уличные" концентрации). Кроме того, присутствие красителей, используемых для камуфляжа наркотика или окрашенных сопутствующих веществ из растительного сырья, может сказываться на ходе реакции и оценке конечного результата. На качество результатов могут также повлиять и различные комбинации, "коктейли" одурманивающих средств, используемых на наркорынке.

Чтобы достигнуть максимальной отдачи от предварительных тестов, необходимо соблюдать следующие правила:

Если количество образца очень мало для оценки экспресс-методом, его необходимо анализировать в стационарных лабораториях.

Из порошкообразных образцов необходимо протестировать несколько крупинок. Если надо повторить анализ, количество образца увеличивают приблизительно до размеров спичечной головки.

От таблеток, других твердых и резиноподобных образцов <например, гашиш, опий) берется небольшой кусочек, измельчается в порошок и анализируется.

Из капсулированных образцов вскрывается одна капсула и несколько крупинок содержимого анализируются (тестируются).

Из растительного сырья отбирается небольшое количество, измельчается и затем тестируется.

При анализе сигарет открывается одна сигарета, содержимое перемешивается, берется небольшое количество содержимого, измельчается и затем тестируется.

Если растительное сырье дает отрицательный ответ по результатам тестового анализа, но в отношении его имеются подозрения, что оно обработано каким-либо химическим веществом, лекарственным препаратом или их комбинацией, то образец его целиком должен быть доставлен в стационарную лабораторию для проведения более тщательного анализа.

 

загрузка...